5. Coluna

As colunas (fase estacionária) são constituídas por um tubo de material inerte, uniforme e capaz de  resistir  às pressões de trabalho. Os diâmetros e comprimento das colunas variam segundo sua finalidade. Há cinco tipos diferentes de fases estacionárias, que implicam em pelo menos cinco modos diferentes de realizar Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. A cromatografia líquido-sólido baseia-se no mecanismo de forças de atrações fracas, em que as moléculas da amostra e da fase móvel competem por sítios ativos na superfície do sólido. As outras são: líquido-líquido, líquida com fases ligadas, por exclusão, de troca iônica e por pareação de íons.

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